乙酰紫堇灵促进大鼠脊髓损伤后的功能恢复:基于调控EGFR/MAPK信号通路抑制小胶质细胞活化

• Published in: 南方医科大学学报 Vol. 43; no. 6; pp. 915 - 923
• Main Authors: 孙洋, 许轶博, 肖林雨, 朱国庆, 李静, 宋雪, 徐磊, 胡建国
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 蚌埠医学院第一附属医院康复科,安徽 蚌埠 233030%蚌埠医学院第一附属医院蚌埠医学院,安徽 蚌埠 233030%蚌埠医学院第一附属医院检验科,安徽 蚌埠 233030%蚌埠医学院第一附属医院中心实验室,安徽 蚌埠 233030 2023
• Subjects: 网络药理学; 脊髓损伤; 炎症; 乙酰紫堇灵; 小胶质细胞
• ISSN: 1673-4254
• DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2023.06.06

目的 探讨乙酰紫堇灵(Ace)对大鼠脊髓损伤(SCI)后功能恢复的作用和机制.方法 使用脊髓撞击仪制备SD大鼠中度挫伤性SCI模型(SCI组),给予不同浓度Ace(10、20、40 mg/kg)腹腔注射干预,以假手术大鼠(Sham组)为对照.通过BBB评分评估SCI大鼠运动功能恢复情况;利用HE染色观察脊髓组织损伤面积变化;采用PCR、ELISA与免疫荧光染色评估脊髓损伤后体内炎症水平(TNF-α、IL-6、IL-1β)变化和小胶质细胞的活化情况(CD11b/CD68).使用脂多糖(LPS组,100 ng/mL)诱导小胶质细胞BV2活化,分别给予不同浓度Ace处理(Ace组,1、2、4 μmol/L),Control组给予等体积DMSO处理.免疫荧光和PCR验证Ace对BV2活化及炎症因子分泌的作用;利用网络药理学预测Ace抑制小胶质细胞活化的靶点蛋白和信号机制,采用AutoDock软件对Ace与预测的靶点蛋白进行分子对接.使用信号通路阻断剂(Osimertinib),在体干预SCI大鼠模型,体外干预LPS诱导的BV2细胞模型,以验证信号机制.结果 大鼠体内实验显示,与SCI组相比,Ace组大鼠BBB评分增高、脊髓损伤面积减小、小胶质细胞活化数量和促炎因子水平减少(P<0.05);体外LPS刺激BV2细胞的研究结果显示,Ace组BV2活化及炎症因子水平显著低于对照组(P<0.05).网络药理学预测EGFR是Ace的主要作用靶点,分子对接技术显示EGFR与Ace的结合能为-8.9 kJ/mol,二者之间存在连接氢键;免疫印迹证实Ace可抑制脊髓组织及BV2细胞中EGFR/MAPK信号通路活化,加入EGFR抑制剂Osimertinib干预后,其抑制效能与Ace相当.结论 Ace可能通过调控EGFR/MAPK通路抑制小胶质细胞介导的炎症反应,从而促进脊髓损伤后组织修复和运动功能恢复,为SCI治疗药物选择提供新的方向.