INTERFERON REGULATORY FACTOR 3 PROMOTER'S METHYLATION IN HIGH-RISK HPV CERVICAL INFECTION

• Published in: Romanian archives of microbiology and immunology Vol. 79; no. 1; pp. 44 - 53
• Main Authors: Fudulu, A, Lancu, I V, Botezatu, A, Plesa, A, Albulescu, A, Huică, I, Socolov, D, Anton, G
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: Bucharest Institutul Cantacuzino 01-01-2020
• Subjects: Actin; Bisulfite; Cervical cancer; Cervix; Deoxyribonucleic acid; DNA; DNA methylation; Epigenetics; Human papillomavirus; Immune response; Innate immunity; Interferon; Interferon regulatory factor; Interferon regulatory factor 3; Kinases; Lesions; Papilloma; Polymerase chain reaction; Statistical analysis; Tissue inhibitor of metalloproteinases; β-Interferon; Germany
• ISSN: 1222-3891; 2601-9418

IRF3 (factorul 3 de reglare a interferonului) este unul dintre principalii factori implicaţi în reglarea răspunsului imun înnăscut. Oncoproteina E6, întâlnită la hrHPV (genotipuri ale virusului Papilloma uman de risc crescut), are capacitatea de a se lega şi de a inhiba transcrierea acestui factor. Pe de altă parte, a fost sugerat că membrii acestei familii de factori transcripţionali sunt reglaţi prin mecanisme epigenetice. Astfel, scopul acestui studiu a fost evaluarea statusului de metilare al promotorului genei IRF3 şi determinarea nivelulului expresiei genelor IRF3 si IFN-ß în leziunile precursoare hrHPV pozitive şi în cancerul de col. Materiale şi metode: Pentru studiu au fost selectate probe pozitive şi negative (lotul control) pentru infecţia cu hrHPV. Pentru acestea s-a realizat izolarea de acizi nucleici (ADN şi ARN), urmată de sinteza ADNc. Evaluarea gradului de metilare s-a realizat prin tratament cu bisulfit şi PCR specific pentru metilare. Nivelul de expresie a genelor, IRF3 şi IFN-ß, a fost cuantificat prin RT-PCR, folosind drept genă de referinţă ß-actina. Pentru interpretarea datelor s-a utilizat programul de analiză statistică GraphPad Prism 6.0. Rezultate: În cazul probelor pozitive, s-a observat o creştere semnificativ statistică a procentului de metilare a IRF3, comparativ cu lotul control (p = 0.0026). Cu excepţia unui singur caz de cancer cervical (CC), nu s-a raportat hipermetilarea promotorului IRF3 în grupele studiate. În acelaşi timp, s-a constatat o creştere semnificativă a nivelului de expresiei al IRF3, atât în leziuni precursoare, cât şi în CC, unde s-a detectat cel mai ridicat nivel. O corelaţie negativă a fost observată între nivelul de expresie al IFN-ß şi procentul de metilare al promotorului IRF3 în grupul LGSIL (leziuni intraepiteliale scuamoase de grad scazut) (r = -0.8929; p = 0.0123). Nu s-au observat diferenţe semnificative când probele au fost grupate în funcţie de genotipul HPV (HPV 16 vs. alte hrHPV). Concluzii: Rezultatele obţinute sugerează că infecţia cu HPV de risc înalt ar putea contribui la metilarea promotorului genei IRF3.