Cultivo primário de células hepáticas de Metynnis roosevelti (Pisces, Teleostei, Characidae)

• Published in: Brazilian journal of veterinary research and animal science Vol. 37; no. 5; pp. 366 - 371
• Main Authors: Ligia Maria Salvo, Maria Ivette Carboni Malucelli, Rosária Regina Tesoni B. Richartz, Metry Bacila
• Format: Journal Article
• Language: English; Portuguese
• Published: Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia 01-01-2000; Universidade de São Paulo
• Subjects: Cultura de célula; Células; Hepatócitos; Metynnis roosevelti; Peixes
• ISSN: 1413-9596; 1678-4456
• DOI: 10.1590/S1413-95962000000500004

A fim de obter culturas celulares e monocamada de células hepáticas do peixe subtropical Metynnis roosevelti, foram comparadas três metodologias: dissociação celular enzimática com tripsina versene 0,25%; utilização do soro fetal bovino; e soro homólogo, obtido por meio da punção da veia caudal, de exemplares adultos da mesma espécie de peixe. O meio de cultura utilizado foi F10-199 acrescido de L-glutamina 2 mM, insulina 10 µg/mL, fibronectina 50 µg/mL; e antibióticos. A dissociação celular enzimática apresentou maior eficiência na adesão e confluência da monocamada celular em comparação a outras metodologias utilizadas.
In order to achieve monolayers and adhesion in cell cultures of hepatocytes from the subtropical fish Metynnis roosevelti (Pisces, Teleostei, Characidae) three different methodologies were used: enzyme cell dissociation by means of a system containing trypsin and versene 0.25%; by means of bovine fetal serum and by the use of blood serum obtained from adult specimens of M. roosevelti. The cell medium used has been a modified F10-199 by the addition of 2 mM L-glutamine, 10 µg/mL insulin, 50 µg/mL fibronectin; and antibiotics. The best results in terms of cell dissociation as well as in terms of adhesion and confluence of the cells monolayer has been achieved by means of the enzymatic cell dissociation.