Rôle inflammatoire et voie de signalisation intracellulaire de PAR-2 dans les kératinocytes différenciés

• Published in: Annales de dermatologie et de vénéréologie Vol. 143; no. 12; pp. S424 - S425
• Main Authors: Gouin, Olivier, Mignen, Olivier, L’Herondelle, Killian, Le Garrec, Raphaele, Le Gall-Ianotto, Christelle, Sakka, Mehdi, Leschiera, Raphael, Talagas, Matthieu, Buhé, Virginie, Plée-Gautier, Emanuelle, Carré, Jean-Luc, Lefeuvre, Luc, Lebonvallet, Nicolas, Misery, Laurent
• Format: Journal Article
• Language: French
• Published: Elsevier Masson SAS 01-12-2016
• Subjects: Inflammation cutanée; Kératinocytes différenciés; PAR-2; PAR-2; Inflammation cutanée; Kératinocytes différenciés
• ISSN: 0151-9638
• DOI: 10.1016/j.annder.2016.09.062

L’activation de PAR-2 dans les kératinocytes basaux renforce l’inflammation cutanée et le prurit par des mécanismes dépendants du calcium et la production de cytokines inflammatoires telles que la TSLP et le TNF-α. Cependant, dans la plupart des études, seuls les kératinocytes primaires issus de la couche basale de l’épiderme sont utilisés pour analyser le rôle de PAR-2 dans l’inflammation cutanée et le prurit. Nous avons étudié sur des cultures primaires de kératinocytes différenciés l’implication de PAR-2 sur la régulation des voies calciques et par conséquent, la modulation de gènes impliqués dans l’inflammation.
Les enregistrements des variations calciques intracellulaires sans Ca2+ extracellulaire ont montré que le SLIGKV, l’agoniste peptide de PAR-2, induisait la libération des réserves calciques. Cette libération était totalement inhibée par l’antagoniste de la PLC (U73122), de l’InsP3R (xestospongineC) et du canal calcique TRPV1 (AMG9810). Après transfection d’un vecteur rapporteur luciférase comprenant le promoteur du NF-κB, nous avons montré que le SLIGKV augmentait l’activité transcriptionnelle du NF-κB. Cette élévation d’activité était inhibée par les antagonistes de TRPV1, de InsP3R et de la PLC. Par la suite, nous avons démontré par RT-qPCR et Elisa que le SLIGKV augmentait l’expression et la sécrétion de la TSLP et du TNF-α. Par ailleurs, le blocage de TRPV1, de l’IP3R et de la PLC inhibait autant l’expression que la sécrétion de nos deux molécules cibles modulées à la hausse par PAR-2.
Nos travaux ont démontré pour la première fois que l’activation de PAR-2 dans les kératinocytes différenciés pouvait favoriser l’inflammation de la peau et le prurit par l’expression et la sécrétion de TSLP et de TNF-α par des mécanismes dépendants de la PLC, du NF-κB et de la libération des réserves calciques à la fois via les canaux InsP3R et TRPV1.