VEZICULE NANOSTRUCTURATE DE INTERES VACCINAL

• Published in: Romanian archives of microbiology and immunology Vol. 81; pp. 43 - 45
• Main Authors: Andrei-Mihai, Dumitrascu, Adriana-Zoe, Costache, Cătălin, Tucureanu, Andreea-Laura, Ermeneanu, Vlad-Constantin, Tofan
• Format: Journal Article
• Language: English; Romanian, Moldovan
• Published: Bucharest Institutul Cantacuzino 01-11-2022
• Subjects: Acids; Filtration; Glycerol; Green fluorescent protein; Lipids; Microfluidics; Nucleic acids; pH effects; Proteins; Sterilization; Tissue inhibitor of metalloproteinases; Vesicles; Zeta potential
• ISSN: 1222-3891; 2601-9418

Obiective. Acest studiu vizează obţinerea unor complexe lipidice de dimensiuni nanometrice care vor putea fi folosite ca transportor (prin înglobare sau prin legarea pe supafraţă) pentru diferiţi agenţi vaccinali (acizi nucleici, proteine). Materiale şi metode. Veziculele lipidice au fost obţinute prin amestecarea unor lipide neutre sau ionizabile, în diferite raporturi molare. Ulterior, amestecul lipidie a fost introdus în faza lichidă (conţinând şi surfactanţi, săruri sau glicerol pe lângă apă) fie prin amestec direct urmat de omogenizare viguroasă, fie prin injectare. Nanostructurarea veziculelor a fost realizată trecând amestecul printr-o unitate de microfluidizare la presiuni mari, iar apoi suspensia a fost filtrată sterilizant prin pori de 220 nm. Nanoveziculele au fost caracterizate prin măsurarea dimensiunii şi a potenţialului zeta (Q prin DLS şi prin testarea potenţialului de a lega acizi nucleici sau proteine model (Enhanced Green Fluorescent Protein). Rezultate şi discuţii. Prin aplicarea metodelor mai sus menţionate au putut fi obţinute vezicule lipidice de dimensiuni cuprinse între 40 nm şi 280 nm. Nanostructurile cu lipide ionizabile leagă cu succes acizi nucleici pe suprafaţa lor conducând atât la modificarea potenţialului zeta cât şi la mărirea suprafeţei veziculelor cu până la 100% in unele formulări. Veziculele cu lipide neutre au legat proteine model (EGFP) la pH acid iar legătura a fost menţinută chiar dacă valoarea pH-ului a fost modificată la pH neutru. Concluzii. Ajustând atât compoziţia şi raportul elementelor constitutive, cât şi modalitatea de prelucrare a veziculelor lipidice brute, putem obţine structuri cu dimensiuni mai mici de 200 nm optime pentru filtrarea sterilizantă. Lipidele ionizabile promovează complexarea suprafeţei veziculelor cu molecule de acizi nucleici. In acelaşi timp, veziculele care conţin lipide neutre leagă eficient proteine fără a modifica funcţia acestora din urmă. Sursa de finanţare: PSCD - Platforma ARMARNVACC, MApN 2022-2024; PN 19 14 0108.