Identificação de Brachyspira spp. em cecos de frangos de corte por meio de histologia e ensaios diagnósticos in situ

• Published in: Semina. Ciências agrárias : revista cultural e científica da Universidade Estadual de Londrina Vol. 42; no. 5
• Main Authors: Monica Regina de Matos, Aline Patrícia Grzegozevski, Alessandra da Cruz, Arthur Colombari Cheng, Amanda Gerelli, Carla Fusco, Leonardo Gruchouskei, Aline de Marco Viott
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: Universidade Estadual de Londrina 01-07-2021
• Subjects: Diagnóstico; Enterite; Espiroquetose intestinal aviária; Hibridização fluorescente in situ; Histologia; Imuno-Histoquímica
• ISSN: 1676-546X; 1679-0359
• DOI: 10.5433/1679-0359.2021v42n5p2813

O gênero Brachyspira corresponde ao grupo de bactérias anteriormente classificadas no gênero Serpulina e inclui várias espiroquetas intestinais comensais e patogênicas que afetam suínos, aves e outras espécies animais, incluindo humanos. Em aves, algumas espécies patogênicas desse gênero causam uma condição conhecida como espiroquetose intestinal aviária, que permanece sub-diagnosticada, causando sérios prejuízos econômicos. Brachyspira é um organismo fastidioso que necessita do emprego de técnicas de identificação rápidas e eficientes. O objetivo deste estudo foi identificar Brachyspira spp. usando histologia, imunohistoquímica (IHQ) e hibridização fluorescente in situ (FISH) em amostras de tecido fixado em formalina e embebido em parafina (TFEP) do ceco de aves comerciais. As amostras foram coletadas de 129 aves com idades entre 35 e 45 dias em granjas comerciais. Para avaliação, o processamento histológico de rotina (H&E) e a técnica histoquímica, ácido periódico-Schiff (PAS) foram realizados. Além disso, as amostras de tecido TFEP foram avaliadas para FISH e IHC. As lesões histológicas foram analisadas e graduadas após coloração H&E, e as células caliciformes contadas e comparadas pela coloração PAS com as amostras positivas e negativas obtidas por FISH e IHC. Para FISH, foram utilizadas sondas marcadas com Brachyspira spp., B. pilosicoli, B. hyodysenteriae e B. intermedia, enquanto o anticorpo policlonal de coelho específico para Brachyspira spp. foi usado para IHC. De 129 amostras, 82 foram positivas com IHC e 86 foram positivas com FISH. As amostras positivas para o gênero Brachyspira pela técnica de FISH foram testadas para B. pilosicoli, B. hyodysenteriae e B. intermedia, sendo 56 positivas para B. pilosicoli, 75 para B. hyodysenteriae e 80 para B. intermedia. Houve aumento de células caliciformes nas amostras positivas para FISH e IHC. As técnicas utilizadas foram eficazes e deram os resultados correspondentes, servindo assim como uma ferramenta de diagnóstico rápida e eficiente.