Otimização da imunoistoquímica para detecção de herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) em tecidos do sistema nervoso central fixados com formaldeído

• Published in: Arquivo brasileiro de medicina veterinária e zootecnia Vol. 57; no. 1; pp. 1 - 6
• Main Authors: Hübner, S.O.(Universidade Federal de Pelotas Faculdade de Veterinária), Pescador, C.(UFRGS Departamento de Patologia Clínica Veterinária), Corbellini, L.G.(UFRGS Departamento de Patologia Clínica Veterinária), Driemeier, D.(UFRGS Departamento de Patologia Clínica Veterinária), Spilki, F.R.(UFRGS Departamento de Microbiologia), Roehe, P.M.(UFRGS Departamento de Microbiologia ,FEPAGRO Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor)
• Format: Journal Article
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal de Minas Gerais, Escola de Veterinária 2005
• Subjects: antigen retrieval; BHV-5; central nervous system; immunohistochemistry; imunoistoquímica; recuperação antigênica; sistema nervoso central; VETERINARY SCIENCES; antigen retrieval; recuperação antigênica; sistema nervoso central; imunoistoquímica; immunohistochemistry; BHV-5; central nervous system
• ISSN: 0102-0935; 1678-4162; 1678-4162
• DOI: 10.1590/s0102-09352005000100001

Com o objetivo de otimizar a técnica de imunoistoquímica para detecção de herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) em tecidos do sistema nervoso central fixado em formaldeído, foram avaliados diferentes métodos de digestão enzimática, diferentes anticorpos e reagentes para bloqueio de reações inespecíficas. As reações apresentaram a máxima intensidade de coloração específica e a quantidade mínima de coloração de fundo quando foram usadas protease de Streptomyces griseus (0,1%) ou proteinase K de Tritirachium album limber (0,05%), mediante incubação durante 15 minutos a 37°C. Entre os anticorpos monoclonais analisados, dois foram capazes de detectar BHV-5. As reações inespecíficas foram bloqueadas mais efetivamente pela incubação do tecido com caseína (0,5%), durante cinco minutos, ou leite em pó (2,5%), durante 60 minutos, ou soro eqüino (2,5%), durante 60 minutos. Com a técnica otimizada foi possível a detecção de BHV-5 em material de arquivo.
In order to optimize immunohistochemical technique (IHC) for detection of Bovine herpesvirus type 5 (BHV-5) on formalin-fixed sections of central nervous system, different methods of enzymatic digestion, use of different antibodies and products for blocking of nonspecific reactivity were evaluated. The reactions showed the highest intensity of specific coloration and the minimum amounts of background when protease from Streptomyces griseus (0.1%) or proteinase K from Tritirachium album limber (0.05%) were used, incubating for 15 minutes at 37°C. Only two of the tested monoclonal antibodies specifically labelled BHV-5 antigen. The nonspecific reactions were blocked through incubation of tissues with casein (0.5%) for five minutes or powdered milk (2.5%) for 60 minutes or equine serum (2.5%) for 60 minutes. The optimized immunohistochemical method allowed the detection of BHV-5 antigen in histopathological archives.