siRNA阻断NF—κB信号通路联合5-Fu对食管鳞癌细胞周期的影响

目的利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达，探讨在食管鳞癌细胞中将NF-κB作为基因治疗靶点的价值。方法将荧光素标记的对照siRNA转染到食管鳞癌细胞中观察转染效率，p65siRNA转染到EC9706和Eca109细胞中，使用Western blot的方法检测p65和Cyclin D1蛋白的表达，使用EMSA法检测转染前后p65与DNA结合活性的变化；流式细胞仪检测p65siRNA与5-Fu（327μg／ml）单独或联合应用，对食管鳞癌细胞周期的影响。结果荧光素标记的siRNA转染食管鳞癌细胞的效率可达90％以上。在转染后的EC9706和Eca109细胞中，p65和Cycli...

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Published in:	Zhongliu fangzhi yanjiu Vol. 35; no. 9; pp. 617 - 620
Main Author:	田芳柴玉荣许培荣刘红涛薛乐勋
Format:	Journal Article
Language:	Chinese
Published:	450052,郑州大学 2008 450052,郑州大学基础医学院病理生理学教研室 450052,郑州大学基础医学院细胞生物学研究室细胞生物学研究室%郑州大学基础医学院组胚教研室,450052%郑州大学基础医学院细胞生物学研究室,450052
Subjects:	Cyclin D1 interference NF-κB RNA 食管鳞癌食管鳞癌 NF-κB RNA interference Cyclin D1
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Description
Summary:	目的利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达，探讨在食管鳞癌细胞中将NF-κB作为基因治疗靶点的价值。方法将荧光素标记的对照siRNA转染到食管鳞癌细胞中观察转染效率，p65siRNA转染到EC9706和Eca109细胞中，使用Western blot的方法检测p65和Cyclin D1蛋白的表达，使用EMSA法检测转染前后p65与DNA结合活性的变化；流式细胞仪检测p65siRNA与5-Fu（327μg／ml）单独或联合应用，对食管鳞癌细胞周期的影响。结果荧光素标记的siRNA转染食管鳞癌细胞的效率可达90％以上。在转染后的EC9706和Eca109细胞中，p65和Cyclin D1蛋白的表达水平下调；NF-κB与DNA的结合活性明显下降；G0／G1期的细胞开始增加，同时S期的细胞逐渐减少；当转染p65sirNA细胞联合使用5-Fu时，G0／G1期的细胞明显增加，同时S期的细胞明显减少。结论p65siRNA可以特异性的阻断NF-κB信号通路，下调NF-κB下游基因中细胞周期蛋白CyclinDl的表达，表明活化的NF-κB信号通路可以成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点。
Bibliography:	42-1241/R Esophageal squamous cell carcinoma; NF-kappaB; RNA interference; Cyclin D1 RNA interference R735.1 Esophageal squamous cell carcinoma NF-kappaB Cyclin D1
ISSN:	1000-8578