LED红光上调MAPK信号促进炎性环境中人牙髓干细胞成骨/成牙本质分化
R78; 目的 探讨发光二极管(light-emitting diode,LED)红光对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨/成牙本质分化的影响及机制.方法 本实验研究已通过单位伦理委员会审查批准.组织块酶消化法培养hDPSCs,在0、1、5、10 μg/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,CCK-8法检测hDPSCs增殖,筛选LPS刺激浓度.设置CG组(矿化诱导)、LPS+CG组、LPS+CG+LED光照组(能量分别为2、4、6、8、10 J/cm2).第7天进行碱性磷酸酶(alkaline phosphat...
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| Published in: | 口腔疾病防治 Vol. 31; no. 10; pp. 701 - 711 |
|---|---|
| Main Authors: | , , , , |
| Format: | Journal Article |
| Language: | Chinese |
| Published: |
西南医科大学口腔医学研究所,四川 泸州646000
2023
西南医科大学附属口腔医院预防保健科,四川 泸州646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室,四川 泸州646000%西南医科大学附属口腔医院预防保健科,四川 泸州646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室,四川 泸州646000%西南医科大学,四川 泸州646000%西南医科大学口腔医学研究所,四川 泸州646000 |
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| Summary: | R78; 目的 探讨发光二极管(light-emitting diode,LED)红光对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨/成牙本质分化的影响及机制.方法 本实验研究已通过单位伦理委员会审查批准.组织块酶消化法培养hDPSCs,在0、1、5、10 μg/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,CCK-8法检测hDPSCs增殖,筛选LPS刺激浓度.设置CG组(矿化诱导)、LPS+CG组、LPS+CG+LED光照组(能量分别为2、4、6、8、10 J/cm2).第7天进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及活性测定,实时荧光定量PCR检测ALP、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialo-phosphoprotein,DSPP)基因表达情况,第21天进行茜素红染色及钙结节定量分析,筛选最佳光照能量.设置LPS+CG组、LPS+CG+LED组(最佳能量),ELISA法检测第1、3、5、7天肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-1β(interlenkin-1β,IL-1β)表达量.Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p38、细胞外调节蛋白激酶5(extracellular regulated protein kinases 5,ERK5)及磷酸化蛋白表达.分别阻断ERK1/2、JNK、ERK5、p38通路后,Western blot法检测第7天ALP、OSX、DMP-1、DSPP蛋白表达.结果 CCK-8结果显示10μg/mL LPS诱导下,在第5、7天hDPSCs增殖低于0、1、5 μg/mL LPS组(P＜0.05),后续选择10 μg/mL作为LPS刺激浓度.ALP染色及活性,ALP、OSX、DMP-1、DSPP的基因表达水平及钙结节定量结果示LPS+CG+4 J/cm2 组均高于其他处理组(P＜0.05).4 J/cm2 |
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| ISSN: | 2096-1456 |
| DOI: | 10.12016/j.issn.2096-1456.2023.10.003 |